Test FISH prenatal pentru detecţia aneuploidiilor

Metoda FISH este o metodă de citogenetică moleculară care se bazează pe realizarea unei hibridări (formarea de legături) între o sondă de ADN marcată fluorescent şi o secvenţă ţintă de ADN, prezentă în proba analizată.

Pentru testarea FISH prenatală a aneuploidiilor (anomalii cromosomice numerice) sunt utilizate cinci sonde ce corespund cromosomilor 13, 18, 21, X şi Y.

Celulele fetale, obţinute prin puncţie de vilozităţi corionice, amniocenteză sau cordonocenteză, sunt prelucrate direct, etalate pe o lamă de microscopie şi hibridate cu sondele mai sus menţionate.

După terminarea procesului celulele sunt analizate la un microscop cu emisie în spectrul ultraviolet, pentru vizualizarea semnalelor fluorescente.

Analiza este calitativă, vizând doar evidenţierea celor cinci cromosomi enumeraţi ( 13, 21, 18, X şi Y), prin numărarea semnalelor fluorescente caracteristice fiecărui cromosom.

Identificarea a două semnale fluorescente corespunzătoare cromosomilor 13, 21, 18 şi X, corelată cu absenţa semnalului corespunzător cromosomului Y corespunde stării de normalitate pentru un embrion de sex feminin. 

Identificarea a două semnale fluorescente corespunzătoare cromosomilor 13, 21, 18 şi a câte unui semnal corespunzător cromosomilor X şi Y corespunde stării de normalitate pentru un embrion de sex masculin.

Identificarea a trei semnale fluorescente corespunzătoare cromosomului 13, 18, 21 sau X, confirmă existenţa unei trisomii a cromosomului respectiv.

Trisomie 21

Trisomie 13

Trisomie 18

Identificarea a două semnale fluorescente corespunzătoare cromosomilor 13, 21, 18 şi a unui singur semnal corespunzător cromosomului X, confirmă prezenţa unei monosomii X.

Monosomie X

Identificarea a două semnale fluorescente corespunzătoare cromosomului X şi a unui semnal fluorescente corespunzător cromosomului Y, confirmă existenţa unei trisomii XXY.

Identificarea a două semnale fluorescente corespunzătoare cromosomului Y şi a unui semnal fluorescente corespunzător cromosomului X, confirmă existenţa unei trisomii XYY.

Trisomie XYY

Identificarea concomitentă a trei semnale fluorescente corespunzătoare cromosomilor 13, 18 şi 21, respectiv a trei semnale corespunzătoare cromosomilor sexuali (X şi Y) confirmă prezenţa unei triploidii.

 

Triploidie

Identificarea concomitentă a patru semnale fluorescente corespunzătoare cromosomilor 13, 18 şi 21, respectiv a patru semnale corespunzătoare cromosomilor sexuali (X şi Y) confirmă prezenţa unei tetraploidii.

Testarea prenatală a aneuploidiilor prin tehnica FISH are avantajul rapidităţii (obţinerea unor rezultate definitive în 24-48 ore) şi a unei sensibilităţi şi specificităţi de 100% (asigurarea unui diagnostic de certitudine).

Dezavantajul major al metodei este acela că permite doar analiza calitativă a celor cinci cromosomi enumeraţi mai sus, fără a fi posibilă identificarea anomaliilor numerice sau structurale ale celorlalţi cromosomi, precum şi a anomaliilor structurale ale celor cinci cromosomi.

Testarea FISH pentru detecţia prenatală aneuploidiilor trebuie dublată de analiza cromosomică completă, care permite detecţia tututror tipurilor de anomalii cromosomice, în limita de rezoluţie a microscopului optic.

Prof.dr. Eusebiu Vlad Gorduza